１）
測定試料の準備：
盲検試料（ｂｌａｎｋ）と５種以上の系列の試料を準備する。
盲検試料とは、目的成分を含まないものであり、マトリックスを考慮する必要があるが、入手困難な場合は、試薬ブランクで代用する。５種以上の系列の試料とは、予測される検出限界を含む濃度であり、かつ間隔は細かいことが望まれる。この系列についてもマトリックスを考慮する。
予測される検出限界が不明な場合、はじめに大まかな系列によって当たりをつけ、続いてさらに細かな間隔で実施する。
２）
試料の測定
それぞれの検体を
ｎ＝ ２０ 以上測定（このシートでは ｎ＝２０ まで）
３）
結果を「検出限界シート」に入力
４）
プロット図の作成
［計算およびグラフ化］ボタンを押すことによって、得られた結果と、その平均値および標準偏差からグラフが作成される。
（５）結果の解釈
「盲検試料（ｂｌａｎｋ）の平均値＋３ＳＤ(＋２SD)の値」（3SD：赤いライン，2SD：黒ライン）と「５種の低値試料の平均値−３ＳＤ(−２SD)」の値が、オーバーラップしない試料の測定値（平均値）を読みとる。この例では０．３２がその値と推定される。なお、試料の測定値がマイナス値で表示されない場合は、吸光度などを利用して求めたり、マイナス値を含まない最小値をｂｌａｎｋ代わりに使用して求める必要がある。
